徠卡顯微鏡神經(jīng)學(xué)的應(yīng)用

2019-06-13 13:19:33

徠卡顯微鏡神經(jīng)科學(xué)的應(yīng)用

 徠卡顯微鏡神經(jīng)學(xué)的應(yīng)用

與急性切片的準(zhǔn)備工作

作為一個嚴(yán)格的監(jiān)管,高度復(fù)雜的細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)的神經(jīng)系統(tǒng)。除了獲得知識網(wǎng)絡(luò)的單個單元,神經(jīng)元細(xì)胞,了解,作為一個整體的網(wǎng)絡(luò)是非常重要的,完成的圖片神經(jīng)元溝通。為研究神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)活動的方法之一是使用厚的片制劑(約300微米)的神經(jīng)組織,因?yàn)榇蠖鄶?shù)的研究軸突切片內(nèi)的細(xì)胞之間的連接保持在這樣的保守的準(zhǔn)備工作。

 


方便切片的制備與徠卡體視顯微鏡

急性切片進(jìn)行活細(xì)胞成像和/或膜片鉗編制是一個非常耗時的過程。與細(xì)膩的組織切片工作需要極大的耐心,經(jīng)驗(yàn)和柔和處理的樣品,以避免干擾的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)振動或其他物理壓力。在籌備過程中一個可靠,精確和方便使用的儀器以優(yōu)異的光學(xué),像徠卡立體顯微鏡,有助于*大限度地減少應(yīng)力,試樣和實(shí)驗(yàn)者。

 


在實(shí)驗(yàn)過程中避免震動

避免生理上的壓力繼續(xù)一次切片的標(biāo)本已經(jīng)轉(zhuǎn)移到實(shí)際的膜片鉗設(shè)置。這里,顯微鏡的任何操作(例如,改變物鏡,使用滑塊,聚焦等)可以擾亂軸突內(nèi)的切片或所獲取的膜片鉗配置的連接。

徠卡DM6000 FS固定臺顯微鏡是專為片準(zhǔn)備工作。由于它的智能機(jī)動化,它可以讓所有的顯微鏡功能,對比的方法來改變放大倍率之間切換,操作沒有觸摸顯微鏡,導(dǎo)致無振動實(shí)驗(yàn)傳導(dǎo)。

 


智能自動化節(jié)省時間和資源

因此,優(yōu)化的自動化概念保存樣品從意外中斷,從而節(jié)省時間和資源。由于所有的載流元件被關(guān)閉,如果不使用,徠卡DM6000 FS提供*高的電子穩(wěn)定演唱會與***的光學(xué)和機(jī)械穩(wěn)定性。結(jié)合徠卡IRAPO HCX25X,0.95 nA水浸物鏡,這使得放大倍率轉(zhuǎn)換器使用,而不是改變物鏡,徠卡DM6000 FS固定臺顯微鏡,膜片鉗和活細(xì)胞成像的*佳選擇片的準(zhǔn)備。


綠色熒光蛋白標(biāo)記的嗅感覺神經(jīng)元

 

















1.鈣染料型Fluo-4負(fù)載細(xì)胞綠色熒光蛋白標(biāo)記的嗅感覺神經(jīng)元的鼠標(biāo)主要嗅覺上皮細(xì)胞在急性片(微分干涉對比)。圖片由daniela Flügge 博士,亞琛工業(yè)大學(xué)亞琛大學(xué),德國。

 

 


2.徠卡DM6000 Fs的固定臺顯微鏡是一個完全自動化的高端研究儀器適用于*的成像實(shí)驗(yàn),除了電工作。憑借其智能的自動化概念,在顯微鏡的所有操作(例如,物鏡/變倍,聚焦,對比的方法之間切換)正在進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)過程中進(jìn)行,而不會造成任何振動。由于所有的載流徠卡DM6000 Fs的元素和電動機(jī)被關(guān)斷,如果在不使用,固定舞臺顯微鏡有助于消除電氣噪聲的膜片鉗安裝。

 

 


3.徠卡HCX IRAPO I 25x/0.95 W的高水浸物鏡是特別設(shè)計(jì)用于電的應(yīng)用程序和近紅外DIC。它結(jié)合了一個相對低放大倍數(shù)(25倍),具有高數(shù)值孔徑0.95),它允許使用沒有得到空放大的倍率換。因此,物鏡幾乎已經(jīng)過時了。此外,物鏡上有一個非常陡峭的角度(41°)一個很長的自由工作距離(2.5毫米),以確保方便地訪問的移液管到樣品中。

 

 


4.鈣染料型Fluo-4負(fù)載細(xì)胞在急性小鼠主片的共焦圖象嗅上皮活細(xì)胞成像用Leica DM6000 CFS固定階段收購顯微鏡。圖片由daniela Flügge 博士,德國亞琛工業(yè)大學(xué)。

 

 

 

 

 





相差與星形膠質(zhì)細(xì)胞



1.GFP標(biāo)記的嗅感覺神經(jīng)元相差與星形膠質(zhì)細(xì)胞的共培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元中的對比度的圖像。“補(bǔ)丁-移液管連接到準(zhǔn)備用于記錄的細(xì)胞。圖片由 Ainhara Aguado博士,德國波鴻魯爾大學(xué)。

 

 


2.徠卡倒置顯微鏡DMI系列是**的工具來執(zhí)行養(yǎng)殖或其他貼壁細(xì)胞的電生理和活細(xì)胞成像。有了模型從非機(jī)動車全電動版本,所有的需求都包括在內(nèi)。

結(jié)合設(shè)備像徠卡快的濾光輪,量身定制的孵化室,機(jī)動階段,用戶友好,功能**的LAS AF軟件,你可以建立補(bǔ)丁夾緊和/或成像設(shè)置,完全滿足您的要求。

 

 


3.徠卡快速外部濾光輪的波長進(jìn)行快速無振動的變化在24毫秒之內(nèi)(相鄰位置),使他們的*快的濾光輪市場。四濾光輪,可同時與5個可自由定義的位置激發(fā)和*大的靈活性的排放側(cè)和一個偉大的上不同的應(yīng)用程序的數(shù)量。由于我們的成像設(shè)備(如攝像機(jī),過濾器通過LAS AF輪轂,百葉窗)時性操作的特殊的音序器電路板軟件,只需點(diǎn)擊幾下鼠標(biāo),我們提供*高的成像速度。

 

 


4.GFP標(biāo)記的嗅感覺神經(jīng)元的急性分離。圖片來源:Jennifer spehr博士,德國亞琛工業(yè)大學(xué)。  

 

 

 

 

 



徠卡神經(jīng)學(xué)顯微鏡

神經(jīng)學(xué)系統(tǒng)




 

徠卡顯微鏡神經(jīng)學(xué)的應(yīng)用

貼壁培養(yǎng)或游離細(xì)胞工作

膜片鉗或活細(xì)胞成像的貼壁細(xì)胞主要有兩個原因:是為了獲得一個特定的培養(yǎng)或新鮮分離的細(xì)胞類型的細(xì)胞生理信息,另一種是內(nèi)獲取信息的特定分子的行為一個生理過程,例如離子通道的信號級聯(lián)。對于*個,感興趣的身體是培養(yǎng)或解離的細(xì)胞本身。對于后者,該信元類型起的作用不大,作為重點(diǎn)是在特定的生理過程中可能發(fā)生的各種細(xì)胞中,或可能被模仿在一個易于培養(yǎng)商業(yè)的感興趣的基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。

 


培養(yǎng)或游離細(xì)胞是**的樣本進(jìn)行活細(xì)胞成像

培養(yǎng)(或分離的)貼壁細(xì)胞生理研究的一個優(yōu)勢是,這些細(xì)胞通常存在于單細(xì)胞層和方便灌注的物質(zhì)(如酶抑制劑或激活的離子通道)。此外,這些標(biāo)本產(chǎn)生的雜散光熒光激發(fā)光,從而縮短曝光時間。這節(jié)省了從光漂白的和有害的照射,這是有利的兩個高速成像和長期活細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)樣品。

 


*適合細(xì)胞倒置顯微鏡工作

大多保持在培養(yǎng)皿培養(yǎng)或游離細(xì)胞。這意味著,倒置顯微鏡可以用來進(jìn)行活細(xì)胞成像或膜片鉗實(shí)驗(yàn)。方便工作與培養(yǎng)皿倒置顯微鏡和周圍的樣品,提供了很大的空間,足夠的的多種微量移液器,吸,灌注針頭及其他設(shè)備的位置。

此外,細(xì)胞膜片鉗移液器執(zhí)行電生理實(shí)驗(yàn)很容易訪問的。

 


設(shè)計(jì)您的顯微鏡設(shè)置

徠卡顯微系統(tǒng)提供一個完全自動化的版本等高端應(yīng)用相結(jié)合的補(bǔ)丁夾緊范圍從非電動的版本為常規(guī)應(yīng)用(徠卡DMI3000 B),通過*的應(yīng)用程序的完全編碼和部分電動顯微鏡(LEICA DMI4000 B)倒置顯微鏡和高速多通道活細(xì)胞成像(徠卡DMI6000 B)。

外圍設(shè)備,如*高速外部濾波器輪(波長切換,在不到24毫秒)和量身定制的氣候室,使您的活細(xì)胞成像顯微鏡的*研究了高端的設(shè)置。